Godzina 13:48 CET (28.02.2011)
Spacerowicze po zjedzeniu śniadania są z powrotem w śluzie Quest, gdzie dołączyli do nich Nespoli i Barratt, którzy pomogą w przygotowaniach do spaceru kosmicznego. Na czas otwartego przejścia pomiędzy śluzą a modułem Unity spacerowicze mieli ubrane maski, oddychając czystym tlenem. Bowen i Drew noc spędzili w śluzie Quest pod ciśnieniem 10.2 psi. Procedury te mają na celu przygotowanie organizmów astronautów na spacer kosmiczny poprzez usunięcie z ich krwiobiegów azotu. Podczas EVA-1 astronauci w skafandrach EMU będą pracowali przy dużo niższym ciśnieniu (oddychając czystym tlenem), co umożliwi poruszanie się i wykonywanie prac. Nieusunięty azot z krwi mógłby doprowadzić do choroby dekompresyjnej (kesonowej), w skrajnych przypadkach prowadzącej do śmierci.